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    影響elisa試劑盒測定成果的原因和解決辦法

    發布時間:2022-02-21    點擊次數:273

      影響elisa試劑盒測定成果的原因和解決辦法

     

      ELISA試劑盒方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,具有靈敏度高,操作簡略等優點,但是在詳細實驗過程中影響要素較多,而且要按照嚴厲的闡明要求,在臨床檢驗中除正常反響外,有時??梢姷叫╁e誤成果(即假陽性或假陰性成果)。

      影響ELISA測定錯誤成果的原因主要有:

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      類風濕因子

      人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)能夠與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致假陽性。

      解決辦法:

      1.用F(ab)2替代完好的IgG;

      2.標本用聯有熱變性(63℃,10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用);

      3.檢測抗原時,能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。

      二、補體

      ELISA系統中固相抗和符號二抗過程中,抗體分子發作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來,使C1q 能夠將二者連接起來,然后形成假陽性。

      解決辦法:

      1.用EDTA稀釋標本;

      2.用53℃,10 min或56℃,30 min加熱血清使C1q滅活。

      三、嗜異性抗體

      人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s) 結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統中抗和二抗連接起來,也能形成假陽性。

      解決辦法:

      可在標本稀釋液中加入過量的動物Ig(s),但加入量不足或亞類不同時無效。

      四、嗜靶抗原的本身抗體

      抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體,有時能與靶抗原結合形成復合物,在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定成果。

      解決辦法:

      測定需用理化方法將其解離后再測定

      影響ELISA試劑盒測定成果的原因和解決辦法! 先和大家介紹到這,如果想要了解更多ELISA試劑盒信息,可以關注天津本生生物,專業給生物醫藥客戶提供生物實驗室檢測耗材,歡迎廣大客戶來詢。

     

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